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酶標(biāo)板振蕩器在Rh陰性稀有血型庫建立中的應(yīng)用

更新時(shí)間：2010-12-15   點(diǎn)擊次數(shù)：5577次

1  材料與方法

    1.1  標(biāo)本  經(jīng)EDTA-K2抗凝的無償獻(xiàn)血者全血標(biāo)本。

    1.2  試劑  抗-D血型

    1.3  器材  平底微孔反應(yīng)板（國產(chǎn)）；平板離心機(jī)；MSK酶標(biāo)板振蕩器；酶標(biāo)儀；進(jìn)口微量移液器。

    1.4  方法  微板法：將抗-D血清25μl和稀釋成一定比例的待檢紅細(xì)胞10μl加到平底微孔反應(yīng)板中，用振蕩儀在一定條件下振蕩均勻，再經(jīng)平板離心機(jī)以1000r/min，離心1min，再用振蕩儀在一定條件下振蕩懸浮。凝集的紅細(xì)胞塊散于孔底，不凝集的紅細(xì)胞呈混懸狀態(tài)。用酶標(biāo)儀630nm波長(zhǎng)自動(dòng)掃描，獲取每孔的相對(duì)透光率（Tc）。試管法和平板法同常規(guī)血型鑒定方法。

    2  結(jié)果

    2.1  振蕩條件的選擇  在混勻及懸浮過程中各選8個(gè)標(biāo)本（陰、陽性標(biāo)本各4孔），在微孔中用上述方法加入抗-D血清和紅細(xì)胞，，振蕩時(shí)間分別為5、10、15、20、25、30s，振幅大小與震蕩時(shí)間成反比，zui終選擇混勻條件500轉(zhuǎn)15s，懸浮條件600轉(zhuǎn)/每分鐘振幅20s。

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